邻苯二甲醛法测定尿素的体会
发布时间：
2022-10-18
尿素是最早被测定的体液中的物质之一t其测定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶联速率法等t这些方法或是存在煮沸，或是试剂价格较昂贵 目前，市场上
供应了邻苯二甲醛显色法(OPA)测定尿素试剂盒，该 法不需煮沸，简便、快速、准确、稳定易得。我们根据反应 原理，在 ISP-M 半自动生化分析仪上进行尿素测定， 效果满意。特做报道
1 原理
在酸性环境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下与 邻苯二甲醛作用生成黄色物质，该物质在偏钒酸根的作 用下变为蓝色物质。该物质藩液颜色的深浅在一定范围
内与血清尿素浓度成正比，与同样处理的标准物一起比 色测定，即可得到血清标本中尿素的浓度。
2 材料与方法
2．I 试剂 OPA法测定尿索试剂盒}其中包括A液 B 液，尿素标准液，僳定长城临床试剂公司t批号 951102。 酶偶联速率法测定尿素试剂盒：上海长征医学科学有限
公司，批号 950828
2．2 仪器
IsP—M 半自动生化分析仅，型号V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在临用前 10：1混台．25ul样 本中加入1．1ml混台液，37"(315分钟．在IsP—M半自 动 生化分析仪上 测定 终点法，比空白调霉，波长 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同时以咎氨酰脱氢 醇偶联反应法，也在半自动生化分析仅上进行动力学分 析。
3 结果与讨论
作者单位，五河县压院检验科(233309) 试剂。但进口试剂价格较贵，使用国产试剂或自配试剂 必须达到与进口试剂相同的检验效果，井用标本质控液 进行标定，方可使用 丛玉隆在血液分析仪应用中的几个问题Ⅲ一文中 指出：细胞直方图既给临床提供诊断参考数据，也为操 作人员提供对仪器工作状态和实验结果是否可信的监 控，一般必须在仔细分析直方图后，确定是否需要显微 镜检查再发报告。我们应该不断的总结经验 ，发现问题， 不断提高专业人员的技术水平，使其更好的为临床医疗 工作服务
3．1 线性范围 在 0～71．4mraol／I范围内配制 Lo种 不同浓度的尿素溶液 ，每种浓度溶液重复测定 3捷 该 法在尿素维度o～28mraol／I之阃线性良好。
3．2 精密度实验 选用高、中、低值尿素(浓度为 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，测定 2O次，其批内CV分别为 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分别为 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事实验
在尿素浓度为 7．87和 21．50mmol／ l的血清标本中，加入尿素浓度为 6．Ommol／1．，然后进行 测定，其回收率分别为 90 和 98
3．4 干扰实验 配制 513mmol／1胆红索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血红蛋白做干扰实 验．发现无明显干扰 (P>005)t维生索 C浓度低于
75mg／1时无干扰(P>0．05)实验室使用的重氨试剂对 苯磺酸可干扰反应．测定时应防止此类物质在实验室中 污染 。
3．5 准确性实验 用 OPA显色法和各氧酰脱氢酶偶联速率法同时测定血清标本 50倒(本院门诊健康体检 者)，分别得 土S为 5．18士1．70、5．28±1．73。统计学
处理，两法无显著性差异(P>0．05)，相关系数 r为 o． 9804．回归方程 Y一1．0ix+0．0456。
总之，邻苯二甲醛法测定尿索既有酶法的方便．可 自动化分析，又价廉，试剂稳定可室温保存，且变异小干 扰固索少，线性范围良好，并与酶法有高度相关。实践证
明该法不失为经济、实用值得推广的尿素测定技术。
尿素是最早被测定的体液中的物质之一t其测定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶联速率法等t这些方法或是存在煮沸，或是试剂价格较昂贵 目前，市场上
供应了邻苯二甲醛显色法(OPA)测定尿素试剂盒，该 法不需煮沸，简便、快速、准确、稳定易得。我们根据反应 原理，在 ISP-M 半自动生化分析仪上进行尿素测定， 效果满意。特做报道
1 原理
在酸性环境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下与 邻苯二甲醛作用生成黄色物质，该物质在偏钒酸根的作 用下变为蓝色物质。该物质藩液颜色的深浅在一定范围
内与血清尿素浓度成正比，与同样处理的标准物一起比 色测定，即可得到血清标本中尿素的浓度。
2 材料与方法
2．I 试剂 OPA法测定尿索试剂盒}其中包括A液 B 液，尿素标准液，僳定长城临床试剂公司t批号 951102。 酶偶联速率法测定尿素试剂盒：上海长征医学科学有限
公司，批号 950828
2．2 仪器
IsP—M 半自动生化分析仅，型号V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在临用前 10：1混台．25ul样 本中加入1．1ml混台液，37"(315分钟．在IsP—M半自 动 生化分析仪上 测定 终点法，比空白调霉，波长 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同时以咎氨酰脱氢 醇偶联反应法，也在半自动生化分析仅上进行动力学分 析。
3 结果与讨论
作者单位，五河县压院检验科(233309) 试剂。但进口试剂价格较贵，使用国产试剂或自配试剂 必须达到与进口试剂相同的检验效果，井用标本质控液 进行标定，方可使用 丛玉隆在血液分析仪应用中的几个问题Ⅲ一文中 指出：细胞直方图既给临床提供诊断参考数据，也为操 作人员提供对仪器工作状态和实验结果是否可信的监 控，一般必须在仔细分析直方图后，确定是否需要显微 镜检查再发报告。我们应该不断的总结经验 ，发现问题， 不断提高专业人员的技术水平，使其更好的为临床医疗 工作服务
3．1 线性范围 在 0～71．4mraol／I范围内配制 Lo种 不同浓度的尿素溶液 ，每种浓度溶液重复测定 3捷 该 法在尿素维度o～28mraol／I之阃线性良好。
3．2 精密度实验 选用高、中、低值尿素(浓度为 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，测定 2O次，其批内CV分别为 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分别为 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事实验
在尿素浓度为 7．87和 21．50mmol／ l的血清标本中，加入尿素浓度为 6．Ommol／1．，然后进行 测定，其回收率分别为 90 和 98
3．4 干扰实验 配制 513mmol／1胆红索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血红蛋白做干扰实 验．发现无明显干扰 (P>005)t维生索 C浓度低于
75mg／1时无干扰(P>0．05)实验室使用的重氨试剂对 苯磺酸可干扰反应．测定时应防止此类物质在实验室中 污染 。
3．5 准确性实验 用 OPA显色法和各氧酰脱氢酶偶联速率法同时测定血清标本 50倒(本院门诊健康体检 者)，分别得 土S为 5．18士1．70、5．28±1．73。统计学
处理，两法无显著性差异(P>0．05)，相关系数 r为 o． 9804．回归方程 Y一1．0ix+0．0456。
总之，邻苯二甲醛法测定尿索既有酶法的方便．可 自动化分析，又价廉，试剂稳定可室温保存，且变异小干 扰固索少，线性范围良好，并与酶法有高度相关。实践证
明该法不失为经济、实用值得推广的尿素测定技术。
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